Audunnys: Omdirigerer til Optisk mikroskopi

2009-05-25T15:10:15Z

← Eldre sideversjon		Sideversjonen fra 25. mai 2009 kl. 15:10
Linje 1:		Linje 1:
	~~== Oppsett ==~~		#REDIRECT [[Optisk_mikroskopi]]
	Består av en kilde (lyspære), "condenser" linser og aperturer, objektivlinser og aperturer og et kamera. Condenser linsen fokuserer lyset til et fokal punkt - back focal plane, mens aperturen begrenser mengden lys. Ved å sette aperturen til at bare litt lys kommer inn øker man kontrasten, men intensiteten minker. Objektivlinsen bestemmer forstørrelsen og er avhenging av den numeriske aperturen (NA). For å øke lysstyrken kan man øke NA, men dette vil samtidig føre til en kortere "working distance".

	~~== Oppløsning, forstørring og kontrast==~~
	~~Oppløsning er gitt av Rayleighs kriterium:~~
	~~<math>r=0.61\frac{\lambda}{\mu sin \alpha}</math>~~
	der <math>\lambda</math> er bølgelengden, <math>\mu</math> er brytningsindeksen og <math>\alpha</math> er halve aperturevinkelen. <math>\mu sin \alpha</math> er gitt som den numeriske aperturen NA, som kan stilles inn på mikroskopet.
	~~Oppløsningen er definert som den minste avstand man kan skille to punkter. Oppløsningen kan økes ved å minimerer bølgelengden eller maksimere den numeriske aperturen.~~

	~~Forstørring er definert som <math>M=\frac{u}{v}</math> der u er størrelsen på bilde og v er størrelsen på objektet.~~

	~~Kontrast er definert som <math>C= \frac{I_{feature}- I_{background}}{I_{background}}</math>~~

	~~Depth of field er dybden man fremdeles har objektet i fokus og er gitt ved: <math>d=r tan \alpha</math>. Økende NA (økende kontrast) gir dermed mindre depth of field.~~

	~~Depht of focus er dybden man fremedeles har bildet i fokus, og er gitt ved:<math>D=M^2d</math> der M er forstørrelsen og d er depth of field.~~

	Avik i oppløsningen er gitt ved sfæriske og kromatiske avik (spherical and cromatic aberrations). Sfæriske avik kommer fra at stråler i forskjellig avstand fra den optiske aksen (forskjellig vinkel) vil fokuseres ved forskjellige fokal punkt. Der en stråle lengre unna aksen vil fokuseres på et punkt nærmere linsen. Kromatiske avik kommer fra at stråler med forskjellig bølgelengde vil fokuserers ved forskjellige fokalpunkt. En stråle med mindre bølgelengde vil fokuseres på et punkt nærmere linsen. Kromatisk avvik kan forsvinne ved bruk av monokromatisk lys.

	~~Astigmatisme kommer fra manglende aksial symmetri ved objektiv linsene, noe som også fører til en usikkerhet i fokalpunktet. Dette kan som regel korrigeres ved å justere linsene.~~

	~~==Teknikker==~~
	~~===Bright field===~~
	~~Bruker lys normalt på prøven, reflektert lys blir dermed lyse felt, mens spredd lys vil spres utenfor linsa, og opptre som mørke felt.~~
	~~===Dark field===~~
	Setter for en aperture slik at lyset kommer på skrått inn mot prøven. Nå blir altså spredd lys til hvite felt, og reflekterlys til mørke felt. Dark field har større kontrast pga at bakgrunnen er mørk (intensiteten er null).
	~~===Phase contrast===~~
	Bruker her at en høydeforskjell i prøven gir en forskjellig veilengde for lyset, og dermed forskjellig fase. Denne forskjellen i fase brukes til å lage kontrast. For å måle forskjellen brukes en faseplate som skifter lyset enda mer. Denne kontrasten er svært god for prøver med lik brytningsindeks som bakgrunnen, for eksempel biologiske prøver.

Ingrhal: Ny side: == Oppsett == Består av en kilde (lyspære), "condenser" linser og aperturer, objektivlinser og aperturer og et kamera. Condenser linsen fokuserer lyset til et fokal punkt - back focal pla...

2009-05-25T12:19:45Z

Ny side: == Oppsett == Består av en kilde (lyspære), "condenser" linser og aperturer, objektivlinser og aperturer og et kamera. Condenser linsen fokuserer lyset til et fokal punkt - back focal pla...

Ny side

== Oppsett ==
Består av en kilde (lyspære), "condenser" linser og aperturer, objektivlinser og aperturer og et kamera. Condenser linsen fokuserer lyset til et fokal punkt - back focal plane, mens aperturen begrenser mengden lys. Ved å sette aperturen til at bare litt lys kommer inn øker man kontrasten, men intensiteten minker. Objektivlinsen bestemmer forstørrelsen og er avhenging av den numeriske aperturen (NA). For å øke lysstyrken kan man øke NA, men dette vil samtidig føre til en kortere "working distance".

== Oppløsning, forstørring og kontrast==
Oppløsning er gitt av Rayleighs kriterium:
<math>r=0.61\frac{\lambda}{\mu sin \alpha}</math>
der <math>\lambda</math> er bølgelengden, <math>\mu</math> er brytningsindeksen og <math>\alpha</math> er halve aperturevinkelen. <math>\mu sin \alpha</math> er gitt som den numeriske aperturen NA, som kan stilles inn på mikroskopet.
Oppløsningen er definert som den minste avstand man kan skille to punkter. Oppløsningen kan økes ved å minimerer bølgelengden eller maksimere den numeriske aperturen.

Forstørring er definert som <math>M=\frac{u}{v}</math> der u er størrelsen på bilde og v er størrelsen på objektet.

Kontrast er definert som <math>C= \frac{I_{feature}- I_{background}}{I_{background}}</math>

Depth of field er dybden man fremdeles har objektet i fokus og er gitt ved: <math>d=r tan \alpha</math>. Økende NA (økende kontrast) gir dermed mindre depth of field.

Depht of focus er dybden man fremedeles har bildet i fokus, og er gitt ved:<math>D=M^2d</math> der M er forstørrelsen og d er depth of field.

Avik i oppløsningen er gitt ved sfæriske og kromatiske avik (spherical and cromatic aberrations). Sfæriske avik kommer fra at stråler i forskjellig avstand fra den optiske aksen (forskjellig vinkel) vil fokuseres ved forskjellige fokal punkt. Der en stråle lengre unna aksen vil fokuseres på et punkt nærmere linsen. Kromatiske avik kommer fra at stråler med forskjellig bølgelengde vil fokuserers ved forskjellige fokalpunkt. En stråle med mindre bølgelengde vil fokuseres på et punkt nærmere linsen. Kromatisk avvik kan forsvinne ved bruk av monokromatisk lys.

Astigmatisme kommer fra manglende aksial symmetri ved objektiv linsene, noe som også fører til en usikkerhet i fokalpunktet. Dette kan som regel korrigeres ved å justere linsene.

==Teknikker==
===Bright field===
Bruker lys normalt på prøven, reflektert lys blir dermed lyse felt, mens spredd lys vil spres utenfor linsa, og opptre som mørke felt.
===Dark field===
Setter for en aperture slik at lyset kommer på skrått inn mot prøven. Nå blir altså spredd lys til hvite felt, og reflekterlys til mørke felt. Dark field har større kontrast pga at bakgrunnen er mørk (intensiteten er null).
===Phase contrast===
Bruker her at en høydeforskjell i prøven gir en forskjellig veilengde for lyset, og dermed forskjellig fase. Denne forskjellen i fase brukes til å lage kontrast. For å måle forskjellen brukes en faseplate som skifter lyset enda mer. Denne kontrasten er svært god for prøver med lik brytningsindeks som bakgrunnen, for eksempel biologiske prøver.

Optiske mikropskop - Sideversjonshistorikk

Audunnys: Omdirigerer til Optisk mikroskopi

Ingrhal: Ny side: == Oppsett == Består av en kilde (lyspære), "condenser" linser og aperturer, objektivlinser og aperturer og et kamera. Condenser linsen fokuserer lyset til et fokal punkt - back focal pla...